12FVIII (Xq28)FIX (Xq27)qp染色体 X血友病A 、B13血友病替代治疗疾病传播，费用昂贵基因治疗没有突破携带者及产前检查杜绝患儿出生、根治疾病14血友病A 为例说明基因诊断的临床应用15血友病携带者和产前诊断流程PCR 扩增外周血DNA 抽提（携带者）直接核酸测序间接联锁分析明确诊断长链PCR 检测内含子1,22 倒位血友病A①、 ② 、③羊水DNA 抽提（胎儿）①③②16FVIII (Xq28)FIX (Xq27)qpX 染色体血友病A 、B17内含子22 倒位18结果（1 ） 内含子22 倒位检测结果19内含子1 倒位机制110内含子1 倒位检测方法2Kb1.5Kb2Kb1.5Kb111间接基因诊断血友病A112 第一代标志 ( 参照国外）F8 基因内的BclⅠRFLP F8 基因内两个STR 位点F8 基因外的St14 VNTR 113 家系15 Bcl I RFLP 位点多态性连锁分析114家系13 st14 位点VNTR 多态的基因连锁分析115内含子13 中STR 多态位点用于家系12 基因连锁分析147/147/147145/147149/147/149147/149145/147147/116国外：4 个位点2 个STR （CA13 、CA22 ），2 个SNPs （BcI I 、Hind Ⅲ）诊断率约为80 ％(Hemophilia. Chapman & Hall, London , 63-74)中国人：用上述4 个位点信息量仅为27%(Clin Chem Lab Med 2001;39(12):1204 －1208 )间接诊断——血友病A 新位点的探索1176 个与F8 紧密连锁的STR 位点： DXS15 、DXS9901 、G6PD 、DXS1073 和DXS1108 距F8 1.5Mb 内1 个F8 内的STR 位点(F8Civs13) 性别位点为牙釉蛋白基因（Amelogenin gene ）终产物 X 染色体102bp ，Y 染色体 108bp 第二代标志（自主开发）118遗传连锁分析的多态性位点的相对位置F8F8Civs13DXS1073G6PDDXS9901DXS15DXS1108ST14CA22119 所用STR 位点在正常人群中检测的结果STR位点片段长度(bp)不同等位基因的数目等位基因频率(%)期望杂合度(%)观察杂合度(%)DXS15145~164100.59~37.8774.9788.24(45/51)DXS9901186~214120.59~37.8779.7782.35(42/51)G6PD168~18860.59~52.0756.0621.57(11/51)DXS1073120~13890.59~49.1159.9262.75(32/51)DXS110876~9640.59~73.3739.9735.29(18/51)F8Civs13152~16860.59~69.8247.6152.94(27/51)120121122第三代标志（自主开发）对象：69 名正常女性、31 个HA 家系（120 名成员）方法：人类基因组数据库中选择了位于F8 基因两端0.5CM 内的3 个STR 位点（5_226 、5_147 及3_486 ），F8 基因内...
